17 februari 2020: Bron: Science 06 Feb 2020

In een eerste menselijke fase I klinische studie werd DNA bewerkende CRISPR-technologie met een vorm van cellulaire therapie (CAR-T cellen) gecombineerd om gevorderde vormen van kanker te behandelen. De onderzoekers gebruikten een multiplexe CRISPR-Cas9 bewerking om T-cellen te moduleren voor de behandeling van 2 patiënten met multiple myeloma (ziekte van Kahler - botkanker) en 1 patiënt met een uitgezaaid sarcoom.

Er werden geen autoimmuun (cytokine release syndrome) gerelateerde bijwerkingen of andere openlijke bijwerkingen waargenomen. De CRISPR-gemodificeerde T-cellen bleven tot 9 maanden actief. Bij de 2 patiënten mdet multiple myeloma bleef de ziekte stabiel en bij de patiënt met het sarcoom was het resultaat wisselend, waarbij een afname van 50% van de grote buiktumor die gedurende 4 maanden aanhield ondanks andere tumoren die wel bleven groeien.

CRISPR-Cas9 gentherapie lijkt een potentieel sterke manier om het natuurlijke vermogen van menselijke T-cellen om kanker te bestrijden te verbeteren. Het is een medisch technisch verhaal maar in het kort: 

De onderzoekers verwijderden twee genen die een rol spelen in de zogeheten endogene T-celreceptor ketens (TCR). TCRa (TRAC) en TCRβ (TRBC) werden verwijderd in T-cellen om op die manier de expressie van een synthetisch, kankerspecifiek TCR-transgen (NY-ESO-1) te verbeteren.  Verwijdering van een derde gen dat codeert voor PD-1 (PDCD1), werd uitgevoerd om de immuniteit tegen tumoren te verbeteren. 

Hier hoe deze aanpak met CRISPR-Cas9 gentherapie werkt:

Fig. 1 Feasibility of CRISPR-Cas9 NYCE T cell engineering.

(A) Schematic representation of CRISPR-Cas9 NYCE T cells. (B) Large-scale expansion of NYCE T cells. Autologous T cells were transfected with Cas9 protein complexed with single guide RNAs (ribonucleoprotein; RNP complex) against TRAC, TRBC (i.e., endogenous TCR deletion) and PDCD1 (i.e., PD-1 deletion) and subsequently transduced with a lentiviral vector to express a transgenic NY-ESO-1 cancer-specific TCR. Cells were expanded in dynamic culture for 8 to 12 days. On the final day of culture, NYCE T cells were harvested and cryopreserved in infusible medium. The total number of enriched T cells during culture is plotted for all four subjects (UPN07, UPN27, UPN35 and UPN39). (C) NY-ESO-1 TCR transduction efficiency was determined in harvested infusion products by flow cytometry. Data are gated on live CD3-expressing and Vβ8.1 or dextramer positive lymphocytes and further gated on CD4 and CD8 positive cells. (D) The frequencies of TRAC, TRBC and PDCD1 gene-disrupted total cells in NYCE infusion products were measured using chip-based digital PCR. All data are representative of at least two independent experiments. Error bars represent mean +/− SEM.

Hier de conclusie van de onderzoekers en ook belangrijk dat hun onderzoek valt onder de regelgeving zoals die geldt voor gentherapie: 

In conclusion, our phase I human pilot study has confirmed that multiplex CRISPR-Cas9 editing of the human genome is possible at clinical scale. We note that while the initial clinical results are safe, experience with more patients given infusions with higher editing efficiencies and longer observation after infusion will be required to fully assess the safety of this approach. The potential rejection of infused cells due to pre-existing immune responses to Cas9 (28, 29) does not appear to be a barrier to the application of this promising technology. Finally, it is important to note that our manufacturing was based on the reagents available in 2016, when our protocol had been reviewed by the NIH Recombinant DNA Advisory Committee and received approval. Our Investigational New Drug Application was subsequently reviewed and accepted by the U.S. FDA. There has been rapid progress in the field since that time, with the development of reagents that should increase efficiencies and decrease off-target editing using CRISPR-based technology (50).

In Science werd het studierapport: CRISPR-engineered T cells in patients with refractory cancer gepubliceerd en gratis in te zien.

Hier het abstract van deze studie:

CRISPR-engineered T cells in patients with refractory cancer

 See all authors and affiliations

Science  06 Feb 2020:
eaba7365
DOI: 10.1126/science.aba7365

Abstract

CRISPR-Cas9 gene editing provides a powerful tool to enhance the natural ability of human T cells to fight cancer. We report a first-in-human phase I clinical trial to test the safety and feasibility of multiplex CRISPR-Cas9 editing to engineer T cells in three patients with refractory cancer. Two genes encoding the endogenous T cell receptor (TCR) chains, TCRα (TRAC) and TCRβ (TRBC) were deleted in T cells to reduce TCR mispairing and to enhance the expression of a synthetic, cancer-specific TCR transgene (NY-ESO-1). Removal of a third gene encoding PD-1 (PDCD1), was performed to improve anti-tumor immunity. Adoptive transfer of engineered T cells into patients resulted in durable engraftment with edits at all three genomic loci. Though chromosomal translocations were detected, the frequency decreased over time. Modified T cells persisted for up to 9 months suggesting that immunogenicity is minimal under these conditions and demonstrating the feasibility of CRISPR gene-editing for cancer immunotherapy.

CRISPR-Cas9 gentherapie, multiple meyeloma, sarcoma, immuuntherapie


Plaats een reactie ...

Reageer op "Solide tumoren: CRISPR-Cas9 gentherapie gericht op afwijkende DNA mutaties en gecombineerd met gemoduleerde T-cellen geeft hoopvolle resultaten bij drie patienten met vergevorderde kanker."


Gerelateerde artikelen